Принципы определения изоферментов

Принципы определения изоферментов

Глутамат-пируват-трансаминаза (ГПТ) Глутамат-пируват-трансаминаза является ферментом, который играет большую роль в обмене аминокислот и катализирует обратимую реакцию: L-аланин + а-кетоглутарат у пируват + L-глутамат В 1971 г. S Н Chen, Е R Giblett впервые описали генетически детерминированный полиморфизм этого фермента, который 215 был открыт ими благодаря электрофоретическому разделению гемолизтов эритроцитов крови в вертикальном крахмальном гелевом блоке. Техника определения групповых изоферментов ГПТ (принципы определения изоферментов), по S Н Chen, Е R Giblett (1971), с небольшими модификациями — метод горизонтального электрофореза в крахмальном геле. Электродный буфер-трис-цитратный буфер (pH 7,5): 0,1 М трис и 0,028 М лимонная кислота. Электродный буфер-трис-цитратный буфер (pH 7,5): 0,1 М трис и 0,028 М лимонная кислота. Гелевый буфер: электродный буфер в разведении 1 : 10. Для внесения гемолизатов в гель крахмала использовали кусочки фильтровальной бумаги фирмы Ватман № 17 или Шлейхер и Шюлль № 2727.

Электрофорез проводили при градиенте напряжения 10—12 В/см в течение17—18 ч в условиях холодильника. Метод выявления ферментативной активности ГПТ. На поверхность продольно разрезанного крахмального геля накладывают фильтровальную бумагу ватман № 1 или Фильтрак FN 1, которая смочена 0,1 М трис-HCl буфером, pH 8,0,. содержащим: 0,2 М Э,Ь-аланина, 0,0087 М а-кетоглутаровой кислоты, 0,001 М восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (NADH2) и 8 ЕД лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на 1 мл раствора. Инкубация геля проходит в течение 3 ч в термостате при 37 °С. Учет результатов реакции производят на темном фоне при облучении крахмального гелядлинноволновыми ультрафиолетовыми лучами.

Решить проблемы с мужской потенцией поможет супер жевитра инструкция по ее применению прилагается к таблеткам. Это джинерик, который дешевле патентованных средств.

1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд (Еще не оценили)
Загрузка ... Загрузка ...

Оставить комментарий

Почта (не публикуется) Обязательные поля помечены *

Вы можете использовать эти HTML теги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>

Подтвердите, что Вы не бот — выберите человечка с поднятой рукой: