Открытие генетически детерминированного полиморфизма АДА

Открытие генетически детерминированного полиморфизма АДА

Для этого 100 мг агара растворяют в 20 мл 0,1 М трис-НС1 буфера, pH 8,0, и около 30 мин варят на водяной бане до полного расплавления зерен агара. После охлаждения в раствор агара (при температуре 40 °С) добавляют: 8 мг аденозина, 30 мг арсената, 2 мг феназинметасульфата (ФМС), 0,04 БД ксантиноксидазы (КОД), 0,4 БД нуклеозидфосфорилазы (НФ) и 2 мг 3 (4,5-диметилтиазолил-2) -2,5-дифенилтетразолиевого бромида (МТТ). Продолжительность агаровой аппликации 1,5—2 ч в термостате при 37 °С. Принцип выявления изоферментов АДА В результате дезаминирования из аденозина образуется инозин, который в дальнейшем под действием нуклеозидфосфорилазы и в присутствии арсената (или фосфата) превращается в гипоксантин. Последний под воздействием ксантиноксидазы окисляется и в результате этого в присутствии феназинметасульфата краситель МТТ редуцируется выпадением нерастворимых гранул фиолетового формазана в местах проявления ферментативной активности АДА. Последний под воздействием ксантиноксидазы окисляется и в результате этого в присутствии феназинметасульфата краситель МТТ редуцируется выпадением нерастворимых гранул фиолетового формазана в местах проявления ферментативной активности АДА. Другие электрофоретические методики, используемые для разделения групповых изоферментов АДА: электрофорез на ацетатцеллюлозных пленках Sonneborn, Renninger, 1970, горизонтальный электрофорез в полиакриламидномгеле Brinkmann, 1971, горизонтальный высоковольтный электрофорез в тонком слое крахмального геля Bauer, Herbich, 1972, комбинированные электрофоретические методы, используемые для одновременного разделения групповых изоферментов АК, АДА и 6-ФГД Martin, Voss, 1978, электрофорез на пленках целлогеля Martin, 1982. При открытии генетически детерминированного полиморфизма АДА вначале было обнаружено три различных ее фенотипа, обозначенные АДА 1, АДА 2 и АДА 2—1.

1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд (Еще не оценили)
Загрузка ... Загрузка ...

Оставить комментарий

Почта (не публикуется) Обязательные поля помечены *

Вы можете использовать эти HTML теги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>

Подтвердите, что Вы не бот — выберите человечка с поднятой рукой: